解放军文职招聘考试原位PCR技术的基本原理-解放军文职人员招聘-军队文职考试-红师教育
发布时间：2017-10-06 21:59:53原位PCR技术的基本原理，就是将PCR技术的高效扩增与原位杂交的细胞定位结合起来，从而在组织细胞原位检测单拷贝或低拷贝的特定的DNA或RNA序列。PCR技术是在DNA聚合酶的作用下，经过模板的变性、退火和引物延伸三种循环，将引物引导下的特异性靶序列迅速地进行扩增，经过扩增的靶序列（一般能扩增106倍），很容易在凝胶电泳或Southern印记杂交中显示出来，因此，PCR技术具有灵敏度高，特异性强的优势，随着热循环自动化的提高与稳定也使得PCR技术的操作简便易行。但是，PCR技术是在液相中进行的，在扩增前，需将细胞破坏，从中提取核酸作为模板，因此很难将PCR的结果与组织细胞的形态结构联系起来，同时，也很难判断含特异性靶序列的细胞类型。原位杂交技术是将分子杂交与组织化学技术结合起来，用标记的DNA或RNA为探针，在原位检测组织细胞内的特定DNA或RNA序列，因此，在显示阳性杂交信号（即特定的DNA或RNA）时，不仅能判别含有靶序列的细胞类型，还能显示组织细胞的形态结构特征与病理变化。但是，原位杂交对拷贝数较少的序列检出有一定的困难，而单拷贝序列或低拷贝序列（10-20拷贝的RNA或单拷贝DNA），则不能被检出，所以原位杂交的敏感性不够。原位PCR技术成功地将PCR技术和原位杂交技术结合起来，保持了两项技术的优势又弥补了各自的不足。原位PCR技术的待检标本一般先经化学固定，以保持组织细胞的良好形态结构。细胞膜和核膜均具有一定的通透性，当进行PCR扩增时，各种成分，如引物，DNA聚合酶，核苷酸等均可进入细胞内或细胞核内，以固定在细胞内或细胞核内的RNA或DNA为模板，于原位进行扩增。扩增的产物一般分子较大，或互相交织，不易穿过细胞膜或在膜内外弥散，从而被保留在原位。这样原有的细胞内单拷贝或低拷贝的特定DNA或RNA序列在原位以呈指数极扩增，扩增的产物就很容易被原位杂交技术检查。
2017解放军文职公共基础知识之科学技术的含义-解放军文职人员招聘-军队文职考试-红师教育
一、科学的含义科学是人对客观世界的认识，是反映客观事实和发展规律的知识，是关于自然界、社会和思维发展的知识体系。科学可以分为自然科学、社会科学和思维科学，以及总括和贯穿于三个领域的哲学和数学。科学标志着人的认识在实践过程中从现象到本质的深化，由经验水平到理性水平的升华。二、技术的含义技术是指人类在利用、改造和保护自然的过程中，通过创新所积累的经验、知识、技巧及共同协作组成的工具和规则体系。现代技术已发展成为一个庞大复杂的系统，主要由三大基本技术，即物质变化技术、能量转换技术和信息控制技术组成。现代技术对社会发展、经济发展等起着重大作用，其中典型代表的门类有：信息技术、生物工程技术、环保技术、空间技术、航空技术、能源技术等。
